Biologia AR Szczecin

Hmmm... a szto to???

To prezentacja z ekotoksykologii

TESTY TOKSYCZNOŚCI Z ZASTOSOWANIEM TESTU NA ROZWELITKACH

Co to jest bioindykacja?

BIOINDYKACJA jest to metoda, która wykorzystując żywy organizm, pozwala ocenić stan środowiska – głównie stan zanieczyszczeń.

Bioindykacyjna ocena różnych technologii produkcji, a także bieżący monitoring ścieków i odpadów sprzyjają tworzeniu technologii proekologicznych.

Ponadto do zadań bioindykacji należą :
    Określenie charakterystyki toksykologicznej substancji biologicznie aktywnej, bądź jej formy użytkowej.
    Ocena stanu ekosystemów.
    Ustalenie pojemności ekosystemów wobec toksyn.
    Ocena interakcji między toksynami.
    Ocena interakcji między toksyną a środowiskiem.
    Ochrona wodociągów przez system reakcji alarmowej.

Bioindykatory stosowane w Polsce
W naszym kraju istnieją Polskie Normy zalecające podobne bioindykatory jak w standardach międzynarodowych:
    glon - Chlorella sp.,
    skorupiaki - Daphnia magna i Gammarus varsoviensis,
    ryba - Lebistes reticulatus.

Możliwość pozyskania organizmu testowego
Organizm testowy musi odpowiadać wielu surowym wymaganiom dotyczącym m.in. ciągłej dostępności i jednorodności genetycznej.

    Można prowadzić stałą hodowlę organizmów testowych – jest to kosztowne, bioindykatory podlegają różnym zmianom co może prowadzić do różnej ich wrażliwości, w zależności od laboratorium.

    Można kupować bioindykatory w formie kryptobiotycznej (wrotki - w formie cyst, skorupiaki - w formie jaj przetrwalnych, glony – jako komórki unieruchomione w nośniku) – formy takie mogą być długo przechowywane i w razie potrzeby w krótkim czasie przygotowane do testu. Eliminacja hodowli pozwala na obniżenie koszów badań.


DAPHTOXKIT F – mikrobiotest toksyczności ostrej

    Mikrobiotest DAPHTOXKIT F pozwala w ciągu 48 godzin ocenić unieruchomienie lub śmiertelność organizmów testowych, przy obliczeniach EC50 lub LC50.

DAPHTOXKIT F
    Test Daphtoxkit F wykorzystuje skorupiaki: Daphnia magna lub Daphnia pulex.
    Organizmy dostarczane są w postaci jaj przetrwalnych, które należy przechowywać w ciemności, w temp. 4-8oC (do kilkunastu miesięcy !!!).
    Oprócz Dafni zestaw zawiera pożywkę oraz sprzęt (pipety, kubki testowe, próbki odniesienia).

Wykonanie testu
    Przed testem cysty muszą być umieszczone w wodzie wraz z pożywką. Pod wpływem silnego światła następuje rozwój form przetrwalnych i po okresie 72 godzin następuje wylęg młodych osobników gotowych do testu.
    Płytkę ze studzienkami należy wypełnić wg. podanego schematu wzrastającymi stężeniami badanej substancji.
    Do każdej ze studzienek należy dodać określoną liczbę Dafni.
    Płytkę należy inkubować w temp. 20oC w ciemności.
    Po 24 i 48 godzinach należy określić ilość martwych i immobilizowanych skorupiaków (zwierząt, które nie są w stanie pływać po łagodnym wzburzeniu płynu przez 15 sek.).
    Wyniki testu należy zanotować i obliczyć LC50 zgodnie ze standardowymi procedurami.

Zalety testu Daphtoxkit F
    Łatwy w wykonaniu.
    Nie wymaga hodowania organizmów w laboratorium i opieki nad organizmami testowymi.
    Szybki.
    Wiarygodny.
    Łatwy do powtórzenia.
    Szeroko stosowany w wielu laboratoriach na świecie, dla rutynowych testów przesiewowych, próbek chemicznych lub środowiskowych.
    Możliwość przechowywania jaj przetrwalnych.
    Minimalne wymagania w zakresie sprzętu: stół, mikroskop, mały inkubator, konwencjonalne szkło laboratoryjne.
    Zgodny z protokołami dotyczącymi testów z Daphnias opisanych przez międzynarodowe organizacje OECD i ISO.
    Łatwa ocena wyników.
    Tani.


Dlaczego Dafnie?
    Dafnie jako organizmy testowe zostały wprowadzone w latach 40-tych naszego stulecia.
    Są to organizmy występujące na całym świecie, w wielu różnych biocenozach słodkowodnych.
    Pełnią one ważną rolę w łańcuchu troficznym pomiędzy producentami a rybami.
    Mają dobrze poznaną fizjologię, co umożliwia ich hodowlę laboratoryjną i prowadzenie długoterminowych testów.
    Są wrażliwe na szerokie spektrum zanieczyszczeń środowiskowych.
    Ze względu na małe rozmiary wymagają małych objętości badanych próbek oraz niewielkiej przestrzeni w laboratorium, zarówno do prowadzenia hodowli, jak i do testów.

Zastosowanie testu z Daphnia magna
BADANIA:
    woda przeznaczona do picia
    woda przeznaczona do uzdatniania
    ścieki
    odbiorcze zbiorniki wodne

Badania toksykologiczne z zastosowaniem Daphnia magna przeprowadzane w Zakładzie Hydrologii Akademii Rolniczej w Szczecinie
    Metoda wykrywania ukrytych zatruć zbiorników wodnych.
    Biologiczna metoda wykrywania trujących substancji przenikających z atmosfery do wody.


Immobilizacja - zahamowanie ruchu skorupiaków

LC50 (lethal concentration) – stężenie związku powodujące śmierć (unieruchomienie) 50% osobników badanej populacji;
EC50 (effective concentration) – stężenie związku powodujące 50% zahamowanie określonego procesu fizjologicznego u organizmów testowych

Hehe tak tak Asia coś umieści, ale dziś wieczorem lub jutro rano